構巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書

服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

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特點優勢：
    1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：產品僅用于科研檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。
抗可提取核抗原抗體試劑盒 質量規格：粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s 包裝;5g

抗可溶性肝抗原抗體試劑盒 質量規格：≥99.0%,BR 包裝;50mg

抗菌肽LL-37 elisa試劑盒 質量規格：HPLC≥98%,標準品 包裝;5MG

抗菌肽試劑盒 質量規格：>500U/mg,BR 包裝;25g

抗菌肽試劑盒 質量規格：>99%,BR,細胞培養級 包裝;5g

抗巨細胞病毒試劑盒 質量規格：>98%,BR 包裝;5ml

抗巨細胞病毒試劑盒 質量規格：>98.5%,BP2009,BR 包裝;25g

抗巨噬細胞抗體試劑盒 質量規格：HPLC>99%,標準品 包裝;5g

抗酒石酸酸性磷酸酶5b試劑盒 質量規格：≥99%,BR 包裝;100ml

抗抗體試劑盒 質量規格：>98%,標準品 包裝;25ml

抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體試劑盒 質量規格：>99%,BR 包裝;500ml

抗角蛋白抗體elisa試劑盒 質量規格：含量≥99.0%(HPLC) 包裝;1g

抗膠原蛋白抗體試劑盒 質量規格：HPLC≥99.0%,標準品 包裝;250mg

抗甲狀腺微粒體抗體試劑盒 質量規格：>95.0%(HPLC),BR,可用于細胞培養 包裝;100ml

抗甲狀腺球蛋白抗體試劑盒 質量規格：>99%,USP33,BR 包裝;25ml

抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒 質量規格：HPLC>98%,標準品 包裝;5ml

抗甲型肝炎病毒抗體IgM試劑盒 質量規格：>98.5%,BR 包裝;100g
構巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書Bacillusmethylotrophicus 中文名稱：甲基營養型芽胞桿菌種屬:Bacillusmethylotrophicus分離基物:稻根際土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:分類學研究。培養方法培養基:CM0904;(R2A);酵母粉0.50g，月示蛋白胨0.50g，,酪蛋白解物0.50g，葡萄糖0.50g，可溶性淀粉0.50g，丙酮酸鈉0.30g，KH2PO40.30g，MgSO4×7H2O0.05g，瓊脂15g。蒸餾1000mL。終pH7.2，在加入瓊脂前用結晶KH2PO4或K2HPO4調pH，加入瓊脂后加熱溶解，并于121℃濕熱滅菌15min。生長條件:30℃;好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Myrotheciumverrucaria 中文名稱：疣孢漆斑菌種屬:Myrotheciumverrucaria分離基物:空氣提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L，葡萄糖20.0g，瓊脂15.0g，pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長條件:25℃;好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Bacillussubtilis 中文名稱：枯草芽胞桿菌種屬:Bacillussubtilis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:蒸汽滅菌指示菌，可用于低于121℃蒸汽滅菌生物指示劑制備。培養方法培養基:營養肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH7.0。[注]培養芽孢桿菌時加入5mgMnSO4·H2O，則有利于產生芽孢。121℃，15分鐘滅菌。生長條件:30℃，好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Fusariumgraminearum 中文名稱：禾谷鐮孢種屬:Fusariumgraminearum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:植物生防拮抗試驗供試病原菌。培養方法培養基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L，葡萄糖20.0g，瓊脂15.0g，pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長條件:30℃;好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Exserohilumturcicum 中文名稱：土耳其凸臍孢菌種屬:Exserohilumturcicum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:植物生防拮抗試驗供試病原菌。培養方法培養基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L，葡萄糖20.0g，瓊脂15.0g，pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長條件:30℃;好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；定期移植法 純度：99%

PseudomonasCocovenenansSubsp 中文名稱：酵米面假單胞菌(酵米面黃桿菌)種屬:PseudomonasCocovenenansSubsp安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:37℃ 純度：99%

Auricularia sp. 中文名稱：木耳（斜面）種屬:Auricularia sp.提供形式:試管斜面安全等級:1模式菌株:no應用領域:食用培養方法培養基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:25-28℃，好氧 純度：99%

Grifola frondosa(Fr.)S.F.Gray 中文名稱：灰樹花（斜面）種屬:Grifola frondosa(Fr.)S.F.Gray提供形式:斜面安全等級:1模式菌株:no應用領域:食用和藥用培養方法培養基:綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然，121℃，15min。生長條件:26℃,7-10天 純度：≥99%