一、儲存溫度對樣本的影響:
生物樣本的長期儲存,通常使用盡可能低的溫度來降低樣本內的生化反應,以提高樣本內各種成分的穩定性。生物大分子、細胞、組織和器官的常用儲存溫度為-80℃(超低溫冰箱)、實驗室樣本樣品恒溫恒濕柜(5-30℃)、-140℃(液氮氣相或深冷冰箱)及-196℃(液氮液相),溫度越低樣本的穩定保存時間越長。
二、常見樣本儲存溫度的選擇:
不同的生物樣本適宜儲存的溫度是不一樣的,選擇樣本的儲存溫度應將樣本的類型、預期儲存的時間、樣本中生物分子的特性、不同細胞的特性考慮在內。
a、固體組織樣本的儲存溫度:
長期儲存的新鮮冰凍組織和OCT包埋冰凍組織應儲存于液氮中,冰凍組織切片或者用于DNA 和RNA提取的冰凍組織應儲存在-80℃。經過福爾馬林固定的石蠟包埋組織及組織切片應儲存在室溫,在低于27℃的環境下,并控制蟲患和濕度。
b、液體樣本的儲存溫度:
對于液體樣本,包括血液和尿液,樣本里的各種成分應在儲存前分離,使得每一種成分能夠在佳條件下儲存。全血、血清、血凝塊、非淋巴細胞和血漿樣本應儲存在-80℃。血沉棕黃層和白細胞應儲存在液氮中。尿液應儲存在-80℃或者液氮中。
c、細胞的儲存溫度:
長期保存的細胞系應儲存在液氮中。氣相液氮比液相液氮儲存樣本更好。雖然液相液氮的溫度更低一些(-196℃),但氣相液氮的溫度(-150℃)仍在臨界溫度之下。對于需要但沒有條件使用液氮保存的細胞樣本,應至少儲存-80℃環境中。
當需要凍融樣本時,應按照標準流程確保樣本的穩定性和質量。樣本在凍存過程中應采用合適的冷卻速度,控制冰晶大小,以及冰晶形成速度,這些將影響到樣本的質量。
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