產品概述
Cellometer K2 Cell Viability Counter雙熒光細胞分析儀
雙熒光精確計數,類流式分析功能
【操作步驟】
【技術特點】
雙熒光和明場成像
通過AO/PI或臺盼藍染活死細胞
雙熒光通道:Ex/Em: 470nm/535nm; Ex/Em:540nm/660nm
細胞成像
細胞形態觀察和活死細胞計數
細胞圖像輸出用于再次分析、報告、發表
模塊識別軟件
識別成簇細胞
精確計數不規則細胞
輕松排除細胞碎片
操作簡便、結果快速
加樣、計數、輸出三步式操作
細胞圖像,計數,大小檢測和活力分析<60s內
小樣本量: 僅需15-20 µl 樣本
細胞濃度范圍廣
明場:細胞濃度范圍1x105-1x107/mL
熒光:細胞濃度無限制
選配專業流式軟件:Denovo FCS Express流式軟件
應用
明場細胞計數和臺盼藍細胞活率檢測;
雙熒光細胞計數和AO/PI細胞活率檢測;
細胞功能分析:細胞周期,細胞凋亡,GFP/RFP轉染效率……
特殊細胞計數:脆弱的肝細胞,脂肪細胞……
可檢測染料:臺盼藍/AO/PI/EB/7AAD/Calcein AM/CFDA...
【友好的軟件界面】
符合GMP/GLP軟件;提供IQOQ。
【AO/PI核熒光染料】
雙熒光計數有核細胞死活的必要性
1. 明場計數不能有效區分有核細胞和無核細胞(如紅細胞,血小板);
2. 臺盼藍計數細胞死活是傳統方法,但是存在各種局限性,無法精確計數有核細胞死活。
AO/PI方法
AO(吖啶橙):膜滲透性核染料,可直接進入完整的細胞膜,和核內核酸結合,可以染所有的有核細胞,發綠色熒光;
PI(碘化丙啶):細胞核染料,不能通過活細胞膜,但卻能穿過破損的細胞膜,在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。
AO/PI兩種核熒光染料共用:僅染有核細胞,紅細胞、血小板等無核細胞及細胞碎片可以精確排除在外;
且活的有核細胞發綠色熒光,而死的有核細胞發紅色熒光,因此可以精確計數有核細胞以及精確計數有核細胞活率。
綠色熒光-活細胞 紅色熒光-死細胞
【原代細胞分析】
PBMC,臍血細胞,骨髓細胞,干細胞,原代腫瘤細胞、肝細胞等原代細胞分析
PBMC(紅細胞少殘留) PBMC(紅細胞多殘留) 脾細胞 原代肝細胞
【應用舉例】
PBMC精確計數和活率分析
紅細胞殘存對細胞計數的影響
明場計數(cells/ml) | AO/PI計數(cells/ml) | RBC殘留% | |
樣本#4 | 9.20X10^6 | 8.61X10^6 | 6.4 |
樣本#5 | 6.96X10^6 | 6.80X10^6 | 1.9 |
樣本#7 | 8.69X10^6 | 8.09X10^6 | 6.9 |
樣本#9 | 8.02X10^6 | 5.10X10^6 | 36.4 |
樣本#15 | 8.56X10^6 | 1.99X10^6 | 76.8 |
樣本#17 | 9.41X10^6 | 3.5X10^6 | 62.8 |
小鼠脾臟細胞的精確計數和活率分析
骨髓細胞的精確計數和活率分析
臍血全血中白細胞的精確計數和活率分析
原代肝細胞計數和活率分析
【美國nexcelom公司】
細胞圖像計數的者;
專注于細胞計數,又不于細胞計數;
Cellometer品牌不于細胞計數、亦可進行細胞活力分析和細胞功能分析。
【Cellometer品牌家族】
細胞計數
儀器原理: 通過明場原理進行細胞計數
儀器代表: AUTO T4, AUTO 1000, Mini系列細胞計數儀
應用領域: 適合細胞系的精確計數
細胞活力
儀器原理: 通過雙熒光原理進行細胞活力分析(AO/PI)
儀器代表: AUTO 2000, K2系列細胞活力分析儀
應用領域: 適合原代細胞的精確計數
細胞功能
儀器原理: 通過雙熒光/雙軟件原理進行細胞功能分析
儀器代表: VISION CBA, K2系列細胞功能分析儀
應用領域: 細胞凋亡/細胞周期/細胞GFP&RFP陽性率等分析