自動化兼容 – 安全處理 – 無表面附著
以前的 GravityPLUS ™懸滴系統(tǒng)。
世界且的 96 孔形式的懸滴板,具有自動化兼容的頂部裝載。
通過的 SureDrop™ 入口從頂部加載細(xì)胞懸液,該入口設(shè)計(jì)用于高度均勻和穩(wěn)定的懸滴
在長期培養(yǎng)中重力輔助形成均勻的球體/有機(jī)體形態(tài)和功能,每孔產(chǎn)生一個球體
適用于許多細(xì)胞類型,包括通常不會在超低附著表面上形成球狀體或類器官的細(xì)胞
包含 10 個 Akura™ PLUS 懸滴板和 10 個 Akura™ 96 球體板,獨(dú)立包裝,由聚苯乙烯和環(huán)烯烴聚合物制成,無菌,包括蓋子。
問:您能否推薦用于生成球體的細(xì)胞懸液的細(xì)胞濃度?
答:對于長期生長分析,我們建議從低細(xì)胞數(shù)開始(每滴 40 µl 250 – 500 個細(xì)胞)。如果需要使用非增殖細(xì)胞或快速生產(chǎn)更大的球體,請從更高的數(shù)量開始(每 40 µl 2500+ 個細(xì)胞)。通常,我們建議在使用新細(xì)胞類型時(shí)嘗試不同的濃度來確定您的范圍。
問:什么是 SureDrop™ 進(jìn)樣口?
答:InSphero 的 Akura™ PLUS 懸滴板采用正在申請的 SureDrop™ 微技術(shù),可以精確分配到懸滴中和從懸滴中吸取。由于液滴體積與接種細(xì)胞數(shù)量相對應(yīng),Akura™ PLUS 懸滴板生產(chǎn)的球體顯示出出色的尺寸一致性,整個 96 孔板的直徑變化不超過 5%。為確保 SureDrop™ 密封,重要的是移液器吸頭與孔表面充分接觸,以確保的液體轉(zhuǎn)移和均勻的液滴形成。彈簧加載的孔彈性調(diào)整,以確保在移液過程中施加向下壓力時(shí)保持接觸。
問:Akura™ PLUS 懸滴板每滴的體積是多少?
答:為了獲得且穩(wěn)定的懸滴,輕輕地將 40 µl(移液速度 < 50 µl/sec)的細(xì)胞懸液注入 Akura™ PLUS 懸滴板的每個孔中。重要提示:要生成大小和細(xì)胞組成均一的球體,必須在接種到 Akura™ PLUS 懸滴板之前輕輕上下吹打,以確保細(xì)胞分布均勻。
問:為什么您建議在轉(zhuǎn)移球體之前預(yù)潤濕 Akura™ 96 板孔?
答:在轉(zhuǎn)移之前需要預(yù)先潤濕 Akura™ 96 板的孔,以防止包含氣泡。為此,通過將放入孔中,將 40 μl 的聚集介質(zhì)應(yīng)用于每個孔。通過將放在井的上腔的壁架上來去除預(yù)潤濕溶液。吸出培養(yǎng)基,直到從每個孔中取出。微量 (< 5-7 µl) 可能殘留在腔室底部。
問:如何將球體轉(zhuǎn)移到接收器 (Akura™ 96) 板中?
答:通過將三個銷釘定位到 Akura™ 96 板頂部表面上的相應(yīng)孔中,將帶有 Akura™ PLUS 板條的框架放在 Akura™ 96 板上。然后,Akura™ PLUS 板下方的液滴將與下方 Akura™ 96 板的孔對齊。使用緩慢的移液速度 (≤ 10 µl /sec),通過 Akura™ PLUS 懸滴板孔的入口加入 70 µl 培養(yǎng)基或緩沖液。確保移液器吸頭與孔入口緊密接觸。
問:防止板外孔蒸發(fā)的方法是什么?
答:外排(周邊)孔的蒸發(fā)是大多數(shù)低容量培養(yǎng)平臺常見的現(xiàn)象,因此需要特別注意保持適當(dāng)?shù)臐穸瓤刂啤?/span>盡管遵循以下建議時(shí),懸滴(Akura™ PLUS 板)的外排或 Akura™ 96 板的孔中蒸發(fā)是可能的。如果不加以控制,顯著的蒸發(fā)會導(dǎo)致培養(yǎng)基成分(例如血清、鹽)的濃縮或沉淀,從而影響球狀體的形成或健康,并可能在長期的過程中改變培養(yǎng)基中化合物/添加劑的有效濃度。學(xué)期實(shí)驗(yàn)。為在使用 Akura™ PLUS 懸滴系統(tǒng)時(shí)提供的濕度控制,我們建議如下:
使用濕度控制良好(>95% 相對濕度)的培養(yǎng)箱,并在保持和盡量減少濕度損失方面進(jìn)行實(shí)踐(例如盡量減少培養(yǎng)箱門的打開和關(guān)閉)。
在 Akura™ PLUS 懸滴板中形成微組織期間,始終使用底板中提供的加濕器墊,并用無菌 0.5x 稀釋的 PBS 浸泡。這是在懸滴中微組織成熟期間保持 Akura™ PLUS 板中適當(dāng)濕度的關(guān)鍵。
對于濕度控制不佳的培養(yǎng)箱,可將低滲緩沖溶液(例如 0.2× PBS)應(yīng)用于加濕墊。
對于 Akura™ 96 板中的培養(yǎng),建議在每個孔中至少加入 50-70 µl 培養(yǎng)基,如果培養(yǎng)箱濕度控制是一個持續(xù)存在的問題,可以增加到最多 80 µl。如果條件需要,也可以將介質(zhì)交換頻率增加到每隔一天或每天一次。
我們建議使用 InSphero Incubox (InSphero CS-10-001-00) 來減少使用低頻介質(zhì)交換進(jìn)行長期研究時(shí)的邊緣效應(yīng)。Incubox 將于 2021 年第四季度推出,可在 上購買。