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zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種(γ)球蛋白。后來發(fā)現(xiàn),抗體并不都在γ區(qū);并且位于γ區(qū)的球蛋白,也不一定都具有抗體活性。
1964年,世界衛(wèi)生組織舉行專門會議,將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(Ig),如骨髓瘤蛋白,巨球蛋白血癥、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學的概念,而抗體是生物學功能的概念??梢哉f,幾乎所有抗體都是免疫球蛋白(極少數(shù)抗體為RNA),但并非所有免疫球蛋白都是抗體。
生物活性:
?。?)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
?。?)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
?。?)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
?。?)通過與細胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) ?、僬{(diào)理作用 IgG、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合,增強其吞噬能力,通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization)。 ?、诎l(fā)揮抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用。
多克隆抗體:
定義1:由多個B細胞克隆所產(chǎn)生的抗體,可與不同抗原表位結(jié)合且免疫球蛋白類別各異。
所屬學科:免疫學(一級學科);免疫系統(tǒng)(二級學科);免疫分子(三級學科)
定義2:對特定抗原所產(chǎn)生的一組免疫球蛋白混合物,每種免疫球蛋白能識別抗原分子上的一個表位。
所屬學科:生物化學與分子生物學(一級學科);總論(二級學科)
定義3:多種抗原表位刺激機體免疫系統(tǒng)后,機體產(chǎn)生的針對不同抗原表位的混合抗體。
所屬學科:細胞生物學(一級學科);細胞免疫(二級學科)
生物活性:
?。?)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
?。?)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
?。?)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
?。?)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
?。?)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
?。?)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
?。?)通過與細胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) ?、僬{(diào)理作用 IgG、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合,增強其吞噬能力,通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization)。 ?、诎l(fā)揮抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:
1、制備抗原。
2、選擇實驗動物。
3、動物免疫。
4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
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標準胎牛血清/Fetal bovine serum(Characteriz
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