組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產品名稱 | 路路通探針法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Fructus liquidambaris |
產品規格 | 50次 |
運輸:低溫
保存:負20度
有效期:一年
貨期:現貨 ?
特點優勢:
1. 特異性:
2. 重現性:
3. 靈敏性:
4. 實用性:
性能指標:
1. 試劑盒檢測特異性為100%
2. 檢測試劑盒重現性為100%
3. 靈敏度可達到103/ml
4. 有效期為6個月
使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
路路通探針法PCR鑒定試劑盒技術概論:
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點;能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑。
PCR反應體系與反應條件
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
使用及效果:
CR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
Radix salviae miltiorrhizae丹參探針法PCR鑒定試劑盒1-氧基羰基-beta-咔啉
Radix sanguisorbae地榆LAMP鑒定試劑盒1-羥基-9-甲氧基鐵屎米酮
Radix sanguisorbae地榆PCR鑒定試劑盒11-羥基-6-鐵屎米酮
Radix sanguisorbae地榆染料法PCR鑒定試劑盒9-羥基鐵屎米酮
Radix sanguisorbae地榆探針法PCR鑒定試劑盒9,10-二甲氧基鐵屎米酮
Radix saposhnikoviae防風LAMP鑒定試劑盒4,9-二甲氧基鐵屎米酮
酰胺Pasteurella multocida多殺巴斯德菌染料法熒光定量PCR試劑盒
4-Chloro-1 Naphthol 4-氯-1-萘酚(4ClN)Pasteurella multocida多殺巴斯德菌探針法熒光定量PCR試劑盒
4-Chloro-1 Naphthol 4-氯-1-萘酚(4ClN)Pasteurella pneunotropica侵肺巴斯德菌PCR試劑盒
Cyclophosphamide monohydrate 環磷酰胺 Sigma 售完停售Pasteurella pneunotropica侵肺巴斯德菌染料法熒光定量PCR試劑盒
Dansyl Chloride 丹磺酰氯Pasteurella pneunotropica侵肺巴斯德菌探針法熒光定量PCR試劑盒
N-Hydroxysuccinimide N-羥基二酰亞胺 NHSPasteurella spp.巴斯德氏桿菌屬通用PCR試劑盒