抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
商品屬性:
別 名;EH domain containing 4; EH domain containing protein 4; EH domain-containing protein 4; EH domaincontaining protein 4; EH-domain containing 4; EHdomain containing 4; EHdomain containing4; Hepatocellular carcinoma associated protein 10/11; hepatocellular carcinoma-associated protein 10/11; hepatocellular carcinoma-associated protein HCA11; HGNC:3245; EHD4_HUMAN; Ortholog of rat pincher; PAST homolog 4; PAST4.
規 格 | 50ul、100ul、200ul | 抗體來源 | Rabbit |
英文名稱 | EHD4 | 克隆類型 | Polyclonal |
濃 度 | 1mg/ml | 性 狀 | Liquid |
理論分子量 | 61kDa | 亞 型 | IgG |
商品詳情:
研究領域;心血管 細胞生物 信號轉導
抗體來源;Rabbit
克隆類型;Polyclonal
交叉反應;(predicted: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep, )
產品應用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量;61kDa
細胞定位;細胞漿 細胞膜
性 狀;Liquid
濃 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human EHD4: 441-541/541
亞 型;IgG
純化方法;affinity purified by Protein A
緩 沖 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
公司正在出售的產品:
CDNF重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白 Protein
ADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質素受體(抗原 0.5mgADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質素受體(抗原)
CDK2AP2重組人 CDK2AP2 蛋白 Protein
IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標簽)
F11R Protein Rat 重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標簽)
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乳酸(LD)測試盒(測全血) Lactic acid (LD) test case (whole blood)
乳酸(LD)測試盒(測血清、組織等) Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.)
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒 Lactate dehydrogenase (LDH) test kit
蘋果酸脫氫酶測試盒(測血清) Apple acid dehydrogenase test case (Ce Xueqing)
小鼠氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)檢測試劑盒
Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)檢測試劑盒
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飲料比色法定量檢測試劑盒20次
MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)檢測試劑盒規格:96T/48T
豚鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)檢測試劑盒 ,英文名: MIF ELISA Kit
Human amyloid precursor protein (APP) ELISA Kit 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)檢測試劑盒
MonkeyIerleukin1,IL-1ELISAKit白介素1(IL-1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
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細菌氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
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EHD4蛋白抗體乙酰化組蛋白H2A抗體
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