特點(diǎn):
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:傘枝梨頭霉探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Absidia corymbifera
貨號(hào):GOY96825
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
?
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
產(chǎn)品僅用于科研推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
微細(xì)正青霉Spindly/CCDC99 亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體100 ug
紅色籃狀菌TBX-5 轉(zhuǎn)錄因子Tbx5抗體100 ul
赭鮭色正青霉AAT/Tryptase α-1抗胰蛋白酶抗體100 ul
腸沙門氏菌腸亞種AATK AATK細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗體100 ug
摩氏摩根氏菌NMP-22 核基質(zhì)蛋白22100 ug
腸沙門氏菌腸亞種旺茲沃思血清型AATF 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體100 ug
熱生腫塊芽孢桿菌ABCA1/ABC1 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體100 ug
兩歧雙歧桿菌ABCD1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗體100 ug
普通高溫放線菌ABCB5 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體100 ug
惡臭萊西氏菌ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體100 ug
含羞草結(jié)瘤伯克霍爾德氏菌ABCF1 ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體100 ul
卡氏黃褐桿菌ABCG1 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體100 ul
普通變形菌ABCG2/CD338 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體100 ul
鈍齒棒桿菌KAT4 細(xì)胞周期基因1蛋白抗體100 ul
枯草芽孢桿菌斯氏亞種ABCG4 ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體20 ul
杰丁畢赤酵母ABCG5 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體100 ul
粘性絲孢酵母ABCG8 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體100 ul
淺紅酵母c-Abl/Abl1 非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體100 ul
傘枝梨頭霉探針法熒光定量PCR試劑盒脂多糖(LPS)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse LPS ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
脂蛋白脂酶(LPL)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse Lamina Propria Lymphocyte ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
脂蛋白(Lpa)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse Lpa ELSIA Kit 規(guī)格: 96T/48T
增殖細(xì)胞抗原(PCNA)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse PCNA ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
載脂蛋白B100(apoB100)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse apoB100 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T